zinet home
home home
home ИНТЕЛЛЕКТ-ПОРТАЛ
home Стартовал прием материалов в сборник XХХIX-й научной конференции. Требования к публикациям - в разделе "Объявления".

На главную | Объявления | Отчеты предыдущих конференций | История Украины | Контакты

РЕСУРСЫ ПОРТАЛА:

Тридцать восьмая научно-практическая конференция
(23 - 28 мая 2016 г.)


Тридцать седьмая научно-практическая конференция
(19 - 22 апреля 2016 г.)


Тридцать шестая научно-практическая конференция
(29 декабря 2015 - 5 января 2016 г.)


Тридцать пятая научно-практическая конференция
(24-27 ноября 2015 г.)


Тридцать четвертая научно-практическая конференция
(13-17 октября 2015 г.)


Тридцать третья научно-практическая конференция
(20-27 мая 2015 г.)


Тридцать вторая научно-практическая конференция
(2-7 апреля 2015 г.)


Тридцать первая научно-практическая конференция
(25 февраля - 1 марта 2015 г.)


Тридцатая научно-практическая конференция
(19-25 января 2015 г.)


Двадцать девятая международная научно-практическая конференция
(19-25 ноября 2014 г.)


Двадцать восьмая международная научно-практическая конференция
(08-13 октября 2014 г.)


Двадцать седьмая научно-практическая конференция
(20-25 мая 2014 г.)


Двадцать шестая научно-практическая конференция
(7-11 апреля 2014 г.)


Двадцать пятая юбилейная научно-практическая конференция
(3-7 марта 2014 г.)


Двадцать четвертая научно-практическая конференция
(20-25 января 2014 г.)


Двадцать третья научно-практическая конференция
(10-15 декабя 2013 г.)


Двадцать вторая научно-практическая конференция
(4-9 ноябя 2013 г.)


Первая международная научно-практическая конференция
(14-18 мая 2013 г.)


Двадцать первая научно-практическая конференция
(14-18 мая 2013 г.)


Двадцатая научно-практическая конференция
(20-28 апреля 2013 г.)


Девятнадцатая научно-практическая конференция
(26 февряля - 3 марта 2013 г.)


Восемнадцатая научно-практическая конференция
(22-26 декабря 2012 г.)


Семнадцатая научно-практическая конференция
(22-26 октября 2012 г.)


Шестнадцатая научно-практическая конференция
(09-14 апреля 2012 г.)


Пятнадцатая научно-практическая конференция
(01 - 07 марта 2012 г.)


Четырнадцатая научно-практическая конференция
(12-20 декабря 2011 г.)


Тринадцатая научно-практическая конференция
(28 октября - 09 ноября 2011 г.)


Двенадцатая научно-практическая конференция
(28 мая - 06 июня 2011 г.)


Одинадцатая научно-практическая конференция
(26 апреля - 04 мая 2011 г.)


Десятая научно-практическая конференция
(15-23 марта 2011 г.)


Девятая научно-практическая конференция
(27-31 декабря 2010 г.)


Восьмая научно-практическая конференция
(05-12 декабря 2010 г.)


Седьмая научно-практическая конференция
(28 мая - 7 июня 2010 г.)


Шестая научно-практическая конференция
(1-15 апреля 2010 г.)


Пятая научно-практическая конференция
(20-27 мая 2009 г.)


Четвертая научно-практическая конференция
(10-17 апреля 2009 г.)


Третья научно-практическая конференция
(20-27 декабря 2008 г.)


Вторая научно-практическая конференция
(1-7 ноября 2008 г.)


Первая научно-практическая конференция
(10-15 мая 2008 г.)



НАШИ ПАРТНЕРЫ:

Студия веб-дизайна www.zinet.info



Студия ландшафтного дизайна Флора-МК


Уникальное предложение!



Сайт-визитка - теперь
всего за 200 грн!

подробнее>>>



БИОИНДИКАЦИЯ ЦИТОТОКСИЧНОСТИ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ

 

Лавинская Е.В.

Украина, г. Харьков, ХНУ им. В.Н. Каразина

 

Климова Е.М.

ГУ «Институт общей и неотложной хирургии» АМН Украины

 

Проведена биоиндикация цитотоксичности сыворотки крови с использованием биосенсорной системы на основе одноклеточной водоросли Dunaliella viridis. Установлены достоверные отличия морфо-функциональных показателей D. viridis, вызванных цитотоксическими факторами различной природы. Оценены возможности и перспективы использования биосенсорной системы D. viridis для биоиндикации цитотоксичности биологических жидкостей.

 

В настоящее время остаются важными методы селективного определения различных по размеру и функциям органических соединений в биологических жидкостях, например в крови. Стандартные методы анализа обычно дорогостоящие и требуют большого количества времени для проведения анализа. Поэтому актуальна разработка методологии скрининга низко- и высокомолекулярных цитотоксических факторов в биологических жидкостях.

В различных направлениях биологии широко применяются детекторные системы – биосенсоры. Такие системы обладают высокой чувствительностью, специфичностью, быстротой и требуют малого количества исследуемого материала. Главным преимуществом биосенсоров является высокая чувствительность биомолекул к целевому субстрату. При ничтожно малом количестве материала методы биоиндикации должны быть высокочувствительными [1].

Биоиндикационные методы определения цитотоксичности основаны на формировании специфического ответного сигнала биологически чувствительной системой, усилением этого сигнала и простой системой регистрации. Учитывая способность биосенсорной системы давать различные ответные реакции, можно предположить с его помощью определять суммарные цитотоксические факторы различной природы в биологических жидкостях. Таким образом, биоиндикация как инструмент скрининг-диагностики является перспективным исследовательским направлением, а биосенсоры могут рассматриваться как универсальные регистраторы цитотоксических соединений различной природы.

По статистическим данным основными областями наиболее успешного использования биосенсорного анализа являются промышленная биотехнология, экология, пищевая промышленность, клиническая диагностика. Работа большинства биосенсоров ориентирована на анализ биологических жидкостей и растворенных в ней потенциально токсических продуктов (эндо- и экзометаболитов) [2].

Актуальным является разработка, апробация и внедрение универсальных клеточных биосенсоров, выделяющих достаточный спектр рецепторов и секреторных экзометаболитов, для различных видов биоиндикации, в том случае, когда неизвестна природа потенциальных цитотоксических факторов.

Биосенсорные технологии являются разделом современной биотехнологии. Водоросли как перспективный объект используется в различных областях медицины, фармакологии, экологии, биологии. Различные свойства водорослей можно использовать с целью применения их в качестве клеточного биосенсора как высокочувствительной системы биоиндикации.

Цель работыпроведение скрининговой индикации цитотоксических факторов в биологической жидкости (сыворотка крови), используя возможности клеточного биосенсора Dunaliella viridis, образующихся при различных патологических состояниях.

Материалом исследования служила биологическая жидкость (сыворотка крови больных миастенией). В качестве биосенсора использовали синхронизированную культуру одноклеточной водоросли D. viridis возрастом 18 – 21 день, концентрацией 15 млн. клеток в 1 мл [3].

Для оценки цитотоксичности исследуемой сыворотки в лунки планшета вносили в равных объемах клеточную тест-систему и исследуемую биологическую жидкость [Климова и др., 2006 г.]. После 30-минутной инкубации производили подсчет клеток с измененными морфо-функциональными свойствами и сравнивали с контролем.

Коэффициент общей сывороточной цитотоксичности рассчитали по формуле Кц = (SФ + SМ) / n, где SФ – функциональная суммарная цитотоксичность; SМ – суммарная морфологическая цитотоксичность; n – спонтанный уровень морфо-функциональных изменений (n = 10%) [4].

О степени цитотоксичности исследуемой сыворотки судили по изменению морфологических и функциональных свойств клеточного биосенсора. В результате проведенных исследований выявлено: процент округлившихся клеток увеличился до (29±2,23)%, в контроле – (3±0,35)%; процент неподвижных клеток возрос с (7±0,97)% в контроле до (37±1,63)% в опыте. Коэффициент сывороточной цитотоксичности составил в среднем 5,35 единиц (N £ 1,0). Данный показатель в 15 раз превысил коэффициент суммарной цитотоксичности в сыворотке крови доноров.

В образцах наблюдали также образование микро- и макроагрегатов, состоящих из 15 – 65 клеток D. viridis. Такая ответная реакция проявляется в результате выделения пострадавшими клетками экзометаболитов, которые их агглютинируют.

Разработанная и использованная в работе биосенсорная тест-система на основе одноклеточной водоросли D. viridis, которая дает специфический ответ на присутствие цитотоксических соединений в биологических жидкостях и проявляется трансформацией (изменение формы клеток, размера клеток, утратой подвижности, направления движения, утратой жгутика), агрегацией клеток, оказалась удобным скрининговым инструментом биоиндикации.

Таким образом, в работе показано, что под действием цитотоксических сывороточных факторов происходят изменения различных морфологических и функциональных показателей клеток D. viridis. Также следует учесть, что данная сенсорная система отвечает основным требованиям, предъявляемым к биосенсорам: обладает высокой чувствительностью; происходит быстрое протекание реакции; для анализа требуется минимальное количество исследуемых веществ; метод определения легко доступен. Другими словами, клеточную биосенсорную систему D. viridis можно использовать с целью биоиндикации в экспериментальных исследованиях для оценки суммарных цитотоксических факторов различной природы.

 

Список литературы

 

1.      Божков А.И., Климова Е.М., Бойко В.В. Связь клинических форм миастении с частотой встречаемости HLA-DR-фенотипа и разработка клеточного биосенсора для оценки этой патологии// Науково-теоретичний журнал Президії НАНУ. – 2002. - №3. – с.35 – 40.

2.      Чекман І.С., Горчакова Н.О. Біосенсори: стан та перспективи наукових досліджень // Наука та інновації. – 2008. – Т4, №3. – с. 75 – 79.

3.      Процес діагностики і прогнозу клінічного перебігу патологічного процесу: Свідоцтво про державну реєстрацію прав автора на твір UA № 19128 / Клімова О.М., Божков А.І., Бойко В.В. – Зареєстр. 24.02.2006. – 8с.

4.      Спосіб визначення цитотоксичності лікарських засобів: Патент на корисну модель UA № 10145 / Козарь В.В., Полторак В.В., Божков А.І., Клімова О.М. – Зареєстр. 06.08.2008. – 6с.



Первая научно-практическая конференция
"Инновационный потенциал украинской науки - ХХI век"
(10-15 мая 2008 г.)


(отчет)
Вторая научно-практическая конференция
"Инновационный потенциал украинской науки - ХХI век"
(1-7 ноября 2008 г.)
(отчет)
Третья научно-практическая конференция
"Инновационный потенциал украинской науки - ХХI век"
(20-27 декабря 2008 г.)
(отчет)
Четвертая научно-практическая конференция
(10-17 апреля 2009 г.)
(отчет)
Пятая научно-практическая конференция
(20-27 мая 2009 г.)
(отчет)
Шестая научно-практическая конференция
(1-15 апреля 2010 г.)
(отчет)
Седьмая научно-практическая конференция
(28 мая - 7 июня 2010 г.)
(отчет)
Восьмая научно-практическая конференция
(05-12 декабря 2010 г.)
(отчет)
Девятая научно-практическая конференция
(27-31 декабря 2010 г.)
(отчет)
Десятая научно-практическая конференция
(15-23 марта 2011 г.)
(отчет)
Одинадцатая научно-практическая конференция
(26 апреля 04 мая 2011 г.)
(отчет)
Двенадцатая научно-практическая конференция
(28 мая - 06 июня 2011 г.)
(отчет)
Тринадцатая научно-практическая конференция
(28 октября - 09 ноября 2011 г.)
(отчет)
Четырнадцатая научно-практическая конференция
(12-20 декабря 2011 г.)
(отчет)
Пятнадцатая научно-практическая конференция
(01-07 марта 2012 г.)
(отчет)
Шестнадцатая научно-практическая конференция
(09-14 апреля 2012 г.)
(отчет)
Семнадцатая научно-практическая конференция
(22-26 октября 2012 г.)
(отчет)
Восемнадцатая научно-практическая конференция
(22-26 декабря 2012 г.)
(отчет)
Девятнадцатая научно-практическая конференция
(26 февраля - 3 марта 2013 г.)
(отчет)
Двадцатая научно-практическая конференция
(20-28 апреля 2013 г.)
(отчет)
Двадцать первая научно-практическая конференция
(13-18 мая 2013 г.)
(отчет)
Первая международная научно-практическая конференция
"Перспективные направления отечественной науки - ХХI век"
(13-18 мая 2013 г.)
(отчет)
Двадцать вторая научно-практическая конференция
(4-9 ноября 2013 г.)
(отчет)
Двадцать третья научно-практическая конференция
(10-15 декабря 2013 г.)
(отчет)
Двадцать четвертая научно-практическая конференция
(20-25 января 2014 г.)
(отчет)
Двадцать пятая юбилейная научно-практическая конференция
(3-7 марта 2014 г.)
(отчет)
Двадцать шестая научно-практическая конференция
(7-11 апреля 2014 г.)
(отчет)
Двадцать седьмая научно-практическая конференция
(20-25 мая 2014 г.)
(отчет)
Двадцать восьмая научно-практическая конференция
(08-13 октября 2014 г.)
(отчет)
Двадцать девятая научно-практическая конференция"
(19-25 ноября 2014 г.)
(отчет)
Тридцатая научно-практическая конференция
(19-25 января 2015 г.)
(отчет)
Тридцать первая научно-практическая конференция
(25 февраля - 1 марта 2015 г.)
(отчет)
Тридцать вторая научно-практическая конференция
(2 - 7 апреля 2015 г.)
(отчет)
Тридцать третья научно-практическая конференция
(20 - 27 мая 2015 г.)
(отчет)
Тридцать четвертая научно-практическая конференция
(13 - 17 октября 2015 г.)
(отчет)
Тридцать пятая научно-практическая конференция
(24 - 27 ноября 2015 г.)
(отчет)
Тридцать шестая научно-практическая конференция
(29 декабря 2015 - 5 января 2016 г.)
(отчет)
Тридцать седьмая научно-практическая конференция
(19 - 22 апреля 2016 г.)
(отчет)
Тридцать восьмая научно-практическая конференция
(23 - 25 мая 2016 г.)
(отчет)

На главную | Объявления | Отчеты предыдущих конференций | История Украины | Контакты

Copyright © Zinet.info Идея сайта - Студия веб-дизайна Zinet